秦艳婷 2025-10-31 09:14:09

    赴青海互助天佑德青稞酒股份有限公司，完成青稞酒糟样品的采集工作。上午抵达天佑德公司，与负责人对接，确认样品采集的具体区域、批次及数量要求。 按照无菌操作规范，使用专用采集容器，从指定酒糟储存区采集 2 份样品，每份样品重量 [X] 克，并现场贴好标签，标注样品编号、采集时间、采集位置等信息。 采集完成后，与公司负责人核对样品信息，签署样品交接确认单，确保信息无误。 下午 [具体时间] 携带采集样品返程，将样品妥善存放于 [指定储存环境，如低温保温箱] 中，确保样品状态稳定。 三、工作成果 成功完成天佑德公司青稞酒糟样品采集，共获取有效样品 [X] 份，样品信息记录完整，已安全带回待后续分析。

秦艳婷 2025-10-31 09:14:09

    赴青海互助天佑德青稞酒股份有限公司，完成青稞酒糟样品的采集工作。上午抵达天佑德公司，与负责人对接，确认样品采集的具体区域、批次及数量要求。按照无菌操作规范，使用专用采集容器，从指定酒糟储存区采集 2 份样品，每份样品重量 [X] 克，并现场贴好标签，标注样品编号、采集时间、采集位置等信息。下午携带采集样品返程，将样品妥善存放于超低温保温箱中，确保样品状态稳定。成功完成天佑德公司青稞酒糟样品采集，共获取有效样品 1份，样品信息记录完整，已安全带回待后续分析。

秦艳婷 2025-10-31 09:55:45

    赴青海互助天佑德青稞酒股份有限公司，完成青稞酒糟样品的采集工作。上午抵达天佑德公司，与负责人对接，确认样品采集的具体区域、批次及数量要求。,按照无菌操作规范，使用专用采集容器，从指定酒糟储存区采集 1份样品，每份样品重量 200克，并现场贴好标签，标注样品编号、采集时间、采集位置等信息。,采集完成后，与公司负责人核对样品信息，签署样品交接确认单，确保信息无误。,下午携带采集样品返程，将样品妥善存放于 超低温中，确保样品状态稳定。工作成果,成功完成天佑德公司青稞酒糟样品采集，共获取有效样品 1 份，样品信息记录完整，已安全带回待后续分析。 /Uploads/file/20251031/690418221ee41.doc|样品采集.doc

秦艳婷 2025-10-31 10:14:00

    一、工作任务​ 基于前期从互助天佑德公司采集的青稞酒糟样品，通过选择性培养基培养、划线分离等实验操作，完成样品中酵母菌的初步分离与纯化，为后续菌种鉴定及特性研究奠定基础。​ 二、前期准备​ 实验器材与试剂：提前检查并准备无菌培养皿（直径 90mm，20 个）、无菌接种环、酒精灯、恒温培养箱（设定 28℃）、超净工作台；配制 YEPD 选择性培养基（酵母提取物 10g/L、蛋白胨 20g/L、葡萄糖 20g/L、琼脂 20g/L，pH 调至 5.5-6.0，121℃高压灭菌 20 分钟后备用）、无菌生理盐水（0.85% NaCl 溶液，灭菌后分装）。​ 样品预处理：取青稞酒糟样品 10g，放入装有 90mL 无菌生理盐水的锥形瓶中，加入无菌玻璃珠，置于摇床（180r/min，28℃）振荡 30 分钟，制成 10⁻¹ 稀释液；随后采用梯度稀释法，依次稀释至 10⁻²、10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵浓度，每个稀释度更换 1 支无菌移液管，确保稀释过程无菌。​ 三、执行过程​ 涂布接种：开启超净工作台，紫外线灭菌 30 分钟后通风；取 10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵三个稀释度的样品稀释液各 0.1mL，分别滴加至已凝固的 YEPD 培养基平板中央，每个稀释度设置 3 个平行样；用无菌涂布器将稀释液均匀涂抹在培养基表面，避免液体堆积。​ 恒温培养：将接种后的培养基平板倒置（防止冷凝水滴落污染菌落），放入 28℃恒温培养箱中，避光培养 48-72 小时，期间每日观察菌落生长情况，记录菌落形态变化。​ 划线分离：培养 48 小时后，观察到平板上出现乳白色、圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的疑似酵母菌落（排除细菌、霉菌等杂菌菌落）；选取 10⁻⁴稀释度平板上长势良好、形态典型的单菌落，用无菌接种环挑取少量菌苔，在新的 YEPD 培养基平板上进行 “分区划线”（每划完一个区域灼烧接种环，冷却后再划下一区），重复划线 2-3 次，确保获得单一纯化菌落。​ 纯化培养与暂存：将划线后的平板再次置于 28℃培养箱中培养 24 小时，待平板上出现均匀的单菌落后，挑取 3 个不同形态的纯化菌落，分别接种至 YEPD 液体培养基中，28℃、180r/min 摇床培养 24 小时，制成菌悬液；取少量菌悬液与 50% 甘油按 1:1 比例混合，置于 - 80℃冰箱暂存，剩余菌悬液用于后续形态观察与生理生化鉴定。​ 四、结果记录​ 菌落生长情况：10⁻³ 稀释度平板菌落密度过高（约 300 个 / 平板，难以区分单菌落），10⁻⁴稀释度平板菌落数为 52-65 个 / 平板，10⁻⁵稀释度平板菌落数为 3-8 个 / 平板，选择 10⁻⁴稀释度平板进行划线分离效果最佳。​ 纯化结果：通过划线分离，成功获得 3 株形态典型的纯化酵母菌落，编号分别为 YJ-01、YJ-02、YJ-03，其中 YJ-01 菌落较大（直径 2-3mm）、YJ-02 菌落中等（直径 1-2mm）、YJ-03 菌落较小（直径 0.5-1mm），均无杂菌污染。​ 问题与处理：初期涂布时因涂布器温度过高，导致 1 个 10⁻³ 稀释度平板局部培养基凝固变形，及时更换新平板重新接种，未影响整体实验进度。 /Uploads/file/20251031/69041d2e0e5c8.pdf|蓝莓果实野生酵母菌株的分离鉴定及发酵性能研究_刘熙.pdf

秦艳婷 2025-10-31 10:40:32

    一、工作任务​ 基于前期从互助天佑德公司采集的青稞酒糟样品，通过选择性培养基培养、划线分离等实验操作，完成样品中酵母菌的初步分离与纯化，为后续菌种鉴定及特性研究奠定基础。​ 二、前期准备​ 实验器材与试剂：提前检查并准备无菌培养皿（直径 90mm，20 个）、无菌接种环、酒精灯、恒温培养箱（设定 28℃）、超净工作台；配制 YEPD 选择性培养基（酵母提取物 10g/L、蛋白胨 20g/L、葡萄糖 20g/L、琼脂 20g/L，pH 调至 5.5-6.0，121℃高压灭菌 20 分钟后备用）、无菌生理盐水（0.85% NaCl 溶液，灭菌后分装）。​ 样品预处理：取青稞酒糟样品 10g，放入装有 90mL 无菌生理盐水的锥形瓶中，加入无菌玻璃珠，置于摇床（180r/min，28℃）振荡 30 分钟，制成 10⁻¹ 稀释液；随后采用梯度稀释法，依次稀释至 10⁻²、10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵浓度，每个稀释度更换 1 支无菌移液管，确保稀释过程无菌。​ 三、执行过程​ 涂布接种：开启超净工作台，紫外线灭菌 30 分钟后通风；取 10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵三个稀释度的样品稀释液各 0.1mL，分别滴加至已凝固的 YEPD 培养基平板中央，每个稀释度设置 3 个平行样；用无菌涂布器将稀释液均匀涂抹在培养基表面，避免液体堆积。​ 恒温培养：将接种后的培养基平板倒置（防止冷凝水滴落污染菌落），放入 28℃恒温培养箱中，避光培养 48-72 小时，期间每日观察菌落生长情况，记录菌落形态变化。​ 划线分离：培养 48 小时后，观察到平板上出现乳白色、圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的疑似酵母菌落（排除细菌、霉菌等杂菌菌落）；选取 10⁻⁴稀释度平板上长势良好、形态典型的单菌落，用无菌接种环挑取少量菌苔，在新的 YEPD 培养基平板上进行 “分区划线”（每划完一个区域灼烧接种环，冷却后再划下一区），重复划线 2-3 次，确保获得单一纯化菌落。​ 纯化培养与暂存：将划线后的平板再次置于 28℃培养箱中培养 24 小时，待平板上出现均匀的单菌落后，挑取 3 个不同形态的纯化菌落，分别接种至 YEPD 液体培养基中，28℃、180r/min 摇床培养 24 小时，制成菌悬液；取少量菌悬液与 50% 甘油按 1:1 比例混合，置于 - 80℃冰箱暂存，剩余菌悬液用于后续形态观察与生理生化鉴定。​ 四、结果记录​ 菌落生长情况：10⁻³ 稀释度平板菌落密度过高（约 300 个 / 平板，难以区分单菌落），10⁻⁴稀释度平板菌落数为 52-65 个 / 平板，10⁻⁵稀释度平板菌落数为 3-8 个 / 平板，选择 10⁻⁴稀释度平板进行划线分离效果最佳。​ 纯化结果：通过划线分离，成功获得 3 株形态典型的纯化酵母菌落，编号分别为 YJ-01、YJ-02、YJ-03，其中 YJ-01 菌落较大（直径 2-3mm）、YJ-02 菌落中等（直径 1-2mm）、YJ-03 菌落较小（直径 0.5-1mm），均无杂菌污染。​ 问题与处理：初期涂布时因涂布器温度过高，导致 1 个 10⁻³ 稀释度平板局部培养基凝固变形，及时更换新平板重新接种，未影响整体实验进度。

秦艳婷 2025-10-31 11:42:19

    一、纯化核心目的​ 分离菌株纯化的核心目标是排除杂菌干扰，从混合微生物群落（如青稞酒糟样品中的细菌、霉菌、不同种类酵母菌）中，获取遗传背景单一、形态与生理特性稳定的纯菌株。这是后续菌种鉴定（如形态学观察、生理生化实验）、功能研究（如发酵产酒能力、产酶特性）及菌种保藏的前提，若纯化不彻底，杂菌污染会直接导致后续实验数据失真。​ 二、关键操作步骤与技术要点​ 1. 纯化前准备（保障无菌环境）​ 器具灭菌：接种环需在酒精灯外焰灼烧至红热（从环部到柄部 1/3 处），冷却时避免接触台面或其他物品，可在无菌培养基表面轻触降温；新的 YEPD 培养基平板需提前检查，确保无裂痕、无杂菌菌落，使用前在超净工作台内敞口放置 15 分钟，平衡温度并排除冷凝水。​ 样品筛选：优先选择菌落密度适宜的平板（如前期实验中 10⁻⁴稀释度平板，菌落数 52-65 个 / 平板），避免从密度过高（菌落重叠）或过低（单菌落少）的平板挑取，减少挑取杂菌或挑取同一菌株的概率。​ 2. 划线分离操作（核心纯化手段）​ 划线方法：采用 “分区划线法”，将培养基平板分为 4-5 个区域：​ 第一区（起始区）：用无菌接种环挑取少量疑似酵母菌落（约米粒大小），在平板边缘区域轻轻划 3-5 条平行线，划线时接种环与平板夹角保持 30-45°，力度以不划破培养基表面为宜。​ 灼烧灭菌：划完第一区后，将接种环再次灼烧至红热，冷却后进入第二区。​ 后续分区：第二区划线时，需与第一区的划线交叉 1-2 次（借助第一区的菌量带动第二区接种），后续各区均与前一区交叉，且划线密度逐渐加密，最终在平板边缘区域形成单菌落。​ 关键原则：每划完一个区域必须灼烧接种环，避免不同区域菌量交叉污染；若划线过程中接种环不慎接触台面，需重新灼烧灭菌后更换新平板操作。​ 3. 纯化培养与单菌落筛选​ 培养条件：划线后的平板需倒置培养（防止冷凝水滴落砸坏菌落或导致杂菌扩散），置于 30℃恒温培养箱中避光培养 24-36 小时（酵母菌生长较快，培养时间过长易导致菌落过大、重叠）。​ 单菌落判断标准：纯化后的单菌落需满足 “形态均一”：​ 外观：呈乳白色或淡黄色，圆形，表面光滑湿润（无褶皱），边缘整齐（无锯齿或不规则边缘），与杂菌菌落（如细菌菌落较小、透明或黄色；霉菌菌落有菌丝、颜色多样）有明显区别。​ 稳定性：同一纯化菌株的单菌落，在相同培养条件下，形态、大小、颜色需完全一致，若出现形态差异，需重新挑取单菌落进行二次纯化。​ 4. 纯化后验证（确保纯化效果）​ 镜检观察：挑取纯化后的单菌落，涂片后用美蓝染色（酵母菌细胞壁较厚，美蓝染色后活菌呈无色，死菌呈蓝色），在光学显微镜（1000 倍油镜）下观察：​ 若视野中仅出现椭圆形或圆形的酵母菌细胞，且可见出芽生殖（酵母菌典型特征），无杆状（细菌）、丝状（霉菌菌丝）细胞，说明纯化成功。​ 若发现杂菌细胞，需重新进行划线分离，直至镜检无杂菌。​ 液体培养验证：将纯化后的单菌落接种至 YEPD 液体培养基，28℃、180r/min 摇床培养 24 小时，若培养液呈均匀浑浊状（无沉淀、无絮状物），说明菌株生长稳定且无杂菌（杂菌污染常导致培养液出现分层、沉淀或异常颜色）。​ 三、常见问题与解决方案​ ​常见问题​：划线后无单菌落，全板菌苔​，单菌落形态不一致​ 可能原因​：接种环冷却不彻底，杀死菌株；菌量过多​；挑取时混入杂菌；划线交叉过多​ 解决方案​：接种环冷却时在无菌培养基表面轻触；减少初始挑菌量​；重新挑取形态典型的单菌落；增加灼烧次数，减少交叉​ 单菌落生长缓慢​ 培养基营养不足；培养温度偏低​ 检查 YEPD 培养基配方（确保葡萄糖、酵母提取物含量）；将培养温度上调至 30℃（酵母菌最适生长温度 28-32℃）​ ​四、纯化后菌株暂存（保障菌株活性）​ 纯化后的菌株需及时暂存，避免反复传代导致特性退化：​ 短期暂存：将纯化后的单菌落接种至 YEPD 斜面培养基，28℃培养 24 小时后，置于 4℃冰箱保存，保存时间不超过 1 个月，期间每月传代 1 次。​ 长期暂存：如前期实验中采用的 “甘油保藏法”，将菌悬液与 50% 甘油按 1:1 混合（甘油终浓度 25%），分装至无菌冻存管，标记菌株编号（如 YJ-01）、保藏日期，快速放入 - 80℃冰箱，可保存 1-2 年，解冻时需在 37℃水浴中快速融化，避免反复冻融。 /Uploads/file/20251031/69043051ddd60.jpg|29be4f51f0455e8b321c311fafb3ddf1.jpg:::/Uploads/file/20251031/690430521a260.jpg|316a3979facf1bc1c9d6dd16f8e4c8cc.jpg

秦艳婷 2025-10-31 14:21:54

    本次参观学习聚焦精酿啤酒智能制造核心技术与管理模式，重点调研自动化生产流程优化、菌种培育与应用、品质检测体系、绿色生产技术四大板块，旨在将先进经验转化应用于天佑德企业青稞酒生产，助力提升青稞酒产能效率、产品品质及市场竞争力。 在基地技术负责人带领下，参观了精酿啤酒全自动酿造生产线，涵盖原料粉碎（采用变频式粉碎设备，可根据麦芽硬度自动调节粉碎粒度，出粉均匀度达 98%）、糖化（智能温控糖化罐，通过 PLC 系统精准控制升温速率与保温时间，糖化效率较传统工艺提升 30%）、发酵（恒温恒压发酵罐，配备在线溶氧量与酒精度监测传感器，实时数据同步至中央控制系统，实现发酵过程可视化管理）三大核心环节。基地特色显著：智能制造领先，拥有全自动酿造线，变频粉碎设备、智能温控糖化罐等配备 PLC 系统，精准控温控时，糖化效率提升 30%，实现发酵可视化管理；全流程体系完善，菌种实验室用梯度驯化法育高活性酵母，低温冻干保藏期超 5 年；绿色与合作并重，有高效废水处理及副产品利用技术，还积极分享经验，可与企业深度合作，提供技术指导与资源支持。 针对本次学习内容，结合天佑德企业需求，整理出 3 项可优先落地的技术方向：一是引入智能温控糖化设备，优化青稞糖化工艺；二是建立青稞酒酵母低温冷冻干燥保藏体系；三是搭建成品酒风味物质检测平台，完善品质控制标准。 /Uploads/file/20251031/690455b877d91.docx|互助003号工作站简报202506.docx

秦艳婷 2025-10-31 15:30:39

    一、纯化核心目的​,分离菌株纯化的核心目标是排除杂菌干扰，从混合微生物群落（如青稞酒糟样品中的细菌、霉菌、不同种类酵母菌）中，获取遗传背景单一、形态与生理特性稳定的纯菌株。这是后续菌种鉴定（如形态学观察、生理生化实验）、功能研究（如发酵产酒能力、产酶特性）及菌种保藏的前提，若纯化不彻底，杂菌污染会直接导致后续实验数据失真。​,二、关键操作步骤与技术要点​,1. 纯化前准备（保障无菌环境）​,器具灭菌：接种环需在酒精灯外焰灼烧至红热（从环部到柄部 1/3 处），冷却时避免接触台面或其他物品，可在无菌培养基表面轻触降温；新的 YEPD 培养基平板需提前检查，确保无裂痕、无杂菌菌落，使用前在超净工作台内敞口放置 15 分钟，平衡温度并排除冷凝水。​,样品筛选：优先选择菌落密度适宜的平板（如前期实验中 10⁻⁴稀释度平板，菌落数 52-65 个 / 平板），避免从密度过高（菌落重叠）或过低（单菌落少）的平板挑取，减少挑取杂菌或挑取同一菌株的概率。​,2. 划线分离操作（核心纯化手段）​,划线方法：采用 “分区划线法”，将培养基平板分为 4-5 个区域：​,第一区（起始区）：用无菌接种环挑取少量疑似酵母菌落（约米粒大小），在平板边缘区域轻轻划 3-5 条平行线，划线时接种环与平板夹角保持 30-45°，力度以不划破培养基表面为宜。​,灼烧灭菌：划完第一区后，将接种环再次灼烧至红热，冷却后进入第二区。​,后续分区：第二区划线时，需与第一区的划线交叉 1-2 次（借助第一区的菌量带动第二区接种），后续各区均与前一区交叉，且划线密度逐渐加密，最终在平板边缘区域形成单菌落。​,关键原则：每划完一个区域必须灼烧接种环，避免不同区域菌量交叉污染；若划线过程中接种环不慎接触台面，需重新灼烧灭菌后更换新平板操作。​,3. 纯化培养与单菌落筛选​,培养条件：划线后的平板需倒置培养（防止冷凝水滴落砸坏菌落或导致杂菌扩散），置于 30℃恒温培养箱中避光培养 24-36 小时（酵母菌生长较快，培养时间过长易导致菌落过大、重叠）。​,单菌落判断标准：纯化后的单菌落需满足 “形态均一”：​,外观：呈乳白色或淡黄色，圆形，表面光滑湿润（无褶皱），边缘整齐（无锯齿或不规则边缘），与杂菌菌落（如细菌菌落较小、透明或黄色；霉菌菌落有菌丝、颜色多样）有明显区别。​,稳定性：同一纯化菌株的单菌落，在相同培养条件下，形态、大小、颜色需完全一致，若出现形态差异，需重新挑取单菌落进行二次纯化。​,4. 纯化后验证（确保纯化效果）​,镜检观察：挑取纯化后的单菌落，涂片后用美蓝染色（酵母菌细胞壁较厚，美蓝染色后活菌呈无色，死菌呈蓝色），在光学显微镜（1000 倍油镜）下观察：​,若视野中仅出现椭圆形或圆形的酵母菌细胞，且可见出芽生殖（酵母菌典型特征），无杆状（细菌）、丝状（霉菌菌丝）细胞，说明纯化成功。​,若发现杂菌细胞，需重新进行划线分离，直至镜检无杂菌。​,液体培养验证：将纯化后的单菌落接种至 YEPD 液体培养基，28℃、180r/min 摇床培养 24 小时，若培养液呈均匀浑浊状（无沉淀、无絮状物），说明菌株生长稳定且无杂菌（杂菌污染常导致培养液出现分层、沉淀或异常颜色）。​,三、常见问题与解决方案​,​常见问题​：划线后无单菌落，全板菌苔​，单菌落形态不一致​,可能原因​：接种环冷却不彻底，杀死菌株；菌量过多​；挑取时混入杂菌；划线交叉过多​,解决方案​：接种环冷却时在无菌培养基表面轻触；减少初始挑菌量​；重新挑取形态典型的单菌落；增加灼烧次数，减少交叉​,单菌落生长缓慢​,培养基营养不足；培养温度偏低​,检查 YEPD 培养基配方（确保葡萄糖、酵母提取物含量）；将培养温度上调至 30℃（酵母菌最适生长温度 28-32℃）​,​四、纯化后菌株暂存（保障菌株活性）​,纯化后的菌株需及时暂存，避免反复传代导致特性退化：​,短期暂存：将纯化后的单菌落接种至 YEPD 斜面培养基，28℃培养 24 小时后，置于 4℃冰箱保存，保存时间不超过 1 个月，期间每月传代 1 次。​,长期暂存：如前期实验中采用的 “甘油保藏法”，将菌悬液与 50% 甘油按 1:1 混合（甘油终浓度 25%），分装至无菌冻存管，标记菌株编号（如 YJ-01）、保藏日期，快速放入 - 80℃冰箱，可保存 1-2 年，解冻时需在 37℃水浴中快速融化，避免反复冻融。 /Uploads/file/20251031/690469e0a6d2c.docx|互助003号工作站日志20250614.docx

秦艳婷 2025-10-31 16:29:01

    三茬酒糟采集菌株的鉴定 一、实验目的​ 从青稞酒糟分离纯化的酵母菌（编号 1C-15a、1C-15b、2C-25、2C-30、3C-14-1、3C-14-2、3C-15、3C-20-1、3C-20-f）中提取高质量基因组 DNA，为后续 16S rRNA 基因测序、菌种鉴定及分子生物学分析提供合格样本。​ 二、DNA 提取过程（采用 索莱宝酵母DNA提取试剂盒，适配酵母菌细胞壁特性）​ 1. 前期准备​​ 菌体收集：取各菌株的 YPD 液体培养菌悬液 5mL，置于 1.5mL 无菌离心管中，12000r/min 离心 5min，弃上清；加入 1mL 无菌生理盐水重悬菌体，再次离心 5min，重复 2 次，彻底去除培养基残留。​ 2. 细胞壁破碎（关键步骤，酵母菌细胞壁较厚需强化处理） 向离心管中加入 500μL CTAB 提取缓冲液，用移液器反复吹打使菌体充分悬浮；加入 30μL 玻璃珠（直径 0.5mm），置于涡旋振荡器上剧烈振荡 30min（通过玻璃珠摩擦破碎细胞壁），随后放入 65℃水浴锅中保温 60min，期间每 15min 轻轻颠倒离心管 1 次，促进 DNA 释放。​ 3. 杂质去除与 DNA 分离​ 蛋白去除：取出离心管，冷却至室温后加入等体积（500μL）氯仿 - 异戊醇混合液，轻轻颠倒混匀 10min（避免剧烈振荡导致 DNA 断裂），12000r/min 离心 10min，此时溶液分层为上层水相（含 DNA）、中层蛋白沉淀、下层有机相，用移液器小心吸取上层水相至新的无菌离心管中（避免吸入中层沉淀）。​ 重复纯化：向收集的水相中再次加入等体积氯仿 - 异戊醇混合液，重复上述操作 1 次，进一步去除残留蛋白与色素（酒糟酵母菌可能携带少量色素杂质，需二次纯化）。​ 4. DNA 沉淀与洗涤​ 沉淀 DNA：向纯化后的水相中加入 0.8 倍体积（约 400μL）预冷异丙醇，轻轻颠倒离心管至出现絮状 DNA 沉淀，置于 - 20℃冰箱静置 30min，使 DNA 充分沉淀；12000r/min 离心 15min，弃上清，可见管底白色 DNA 沉淀。​ 洗涤脱盐：向离心管中加入 1mL 70% 乙醇，轻轻颠倒离心管洗涤 DNA 沉淀（去除残留盐离子与 CTAB），12000r/min 离心 5min，弃上清；重复洗涤 1 次，随后将离心管倒置在无菌滤纸上，室温晾干 10-15min（避免过度干燥导致 DNA 难溶解）。​ 5. DNA 溶解与 RNA 去除​ 向晾干的 DNA 沉淀中加入 50μL 无酶水，轻轻吹打使 DNA 完全溶解，加入 2μL RNase A 溶液，37℃水浴锅中保温 30min，降解 RNA 杂质；最后将提取的 DNA 溶液置于 - 20℃冰箱保存，备用。​ 三、DNA 提取结果检测 琼脂糖凝胶电泳检测（直观判断 DNA 完整性与纯度）​ 实验操作：配制 1% 琼脂糖凝胶（含 0.5μg/mL EB 染色剂），取各菌株 DNA 提取液 5μL，与 1μL 6×loading buffer 混合后点样；以 λ-Hind III DNA Marker 为参照，在 120V 电压下电泳 30min，电泳结束后在紫外凝胶成像仪下观察结果。​ 判定标准：​ 若出现单一明亮的条带，且位于 Marker 对应 23kb 左右位置（酵母菌基因组 DNA 大小约 12-16Mb，电泳后呈高分子量条带），无弥散条带，说明 DNA 完整性良好，无降解。

秦艳婷 2025-10-31 17:12:43

    联系了青海省农科院、甘肃省农科院就青稞品种筛选和在低海拔区域生长适应性进行讨论，甘肃省农科院筛选了3个品种在江苏淮安种植，与南通元麦进行营养品质进行比较

秦艳婷 2025-10-31 21:29:40

    校企科技联合创制青稞产业园精彩产品 青稞是禾本科大麦属一年生的草本植物青稞Hordeum vulgare var. coeleste Linnaeus，颖果成熟时易于脱出俘体，适宜生长在高原清凉气候的西北和西南地区。耐寒性强，生长期短，高产早熟。青稞不仅是中国藏区居民的主要食粮、燃料、牲畜饲料，啤酒、医药和保健品生产的原料，而且市场上有许多用青稞开发的餐饮特色食品，比如青稞酒、青稞脆片、青稞米、青稞小麻花、青稞蛋酥和青稞奶酥等丰富美味的产品。2025年2月18日，作为青海省海东市互助县003号科技特派员工作站的负责人、青海大学孙万成教授，接受新华社青海分社王大千、陈杰记者采访，希望了解青稞及其酒糟产品的加工现状。孙教授等一行3人参观了青海互助天佑德青稞酒股份有限公司的互助青稞产业园、西宁生物园区华实研究院的检测设备和车间及产品展示区。 在青稞产品的展销区，看到了已经通过对青稞原料和酒糟的处理后开发上市的各种青稞产品，比如黑青稞燕麦片、青稞麦片、青稞面、手工空心青稞挂面、青稞麦茶和青稞意大利面等。 采访中记者们看到了青稞全产业链条后的产品，而且深深感受到校企合作中科技助力和赋能在青稞全产业链提质增效的强大魅力。目前科技骨干人员正在沟通通过协同创新，深度挖掘青稞功效成分各个方面的康养价值，为青稞产业提供强有力的科技支撑，并创制出服务于老百姓日常健康的高质量产品，让青稞产业在实效中发挥应有的价值。

秦艳婷 2025-10-31 21:35:32

    威思顿薯业公司是一家专注于马铃薯全产业链发展的现代化农业企业，致力于为消费者提供安全、健康、高品质的马铃薯产品。公司以科技创新为驱动，以产业融合为路径，已形成从优质种薯繁育、标准化种植、精深加工到市场销售的完整产业体系，在行业内树立了良好的品牌形象和市场口碑。公司拥有现代化的马铃薯加工生产线，具备年产数万吨马铃薯制品的能力，主要产品涵盖马铃薯淀粉、马铃薯全粉、速冻薯条、薯片以及新型马铃薯休闲食品等。在生产过程中，公司严格执行食品安全管理体系，采用先进的加工工艺和设备，最大限度保留马铃薯的营养成分和天然风味。同时，公司高度重视产品研发创新，不断推出满足市场需求的新产品，提升产品附加值和市场竞争力。

秦艳婷 2025-10-31 21:41:11

    1.公司通过整合种薯繁育、种植、加工、销售等各个环节，实现了从田间到餐桌的全程质量控制，有效降低了中间环节成本，提升了整体运营效率和市场响应速度。 2. 技术与研发优势 依托强大的科研合作平台和专业的技术团队，公司在种薯培育、种植技术、加工工艺等方面拥有多项核心技术和专利，为企业的持续发展提供了有力的技术支撑。 3. 品质与安全优势 公司始终将产品质量和食品安全放在首位，建立了严格的质量追溯体系，从种源、种植到加工、销售的每一个环节都进行严格的质量检测和监控，确保为消费者提供安全、放心的产品。 4. 规模化与标准化优势 规模化的种植基地和标准化的生产管理模式，使得公司能够实现稳定的原料供应和产品质量，同时降低单位生产成本，提高企业的市场竞争力。

秦艳婷 2025-10-31 21:44:23

    1.冰皮月饼预拌粉产品 通过不断改变葡萄糖、马铃薯淀粉、羟丙基二淀粉磷酸酯淀粉、酸性淀粉、海藻提取物和各种使用胶添加量，配制冰皮月饼粉，目前蒸煮后冰皮月饼透亮，冷冻后虽然透明度提高，但是凝胶性不足。 2.抗性马铃薯生全粉工艺研究。采用高压热处理方法制备抗性马铃薯生全粉，通过调整处理时间，研究抗性含量。 4.水产品复配粉（虾滑专用）、（鱼片专用）产品。鱼片粉已上市，虾滑粉调试中。

秦艳婷 2025-11-01 09:27:55

    受青海华实研究院邀请做题为“青稞加工利用现状、未来和市场”的报告和培训。会员参加人员为全体工作站人员和企业员工代表。 科技骨干人员正在沟通通过协同创新，深度挖掘青稞功效成分各个方面的康养价值，为青稞产业提供强有力的科技支撑，并创制出服务于老百姓日常健康的高质量产品，让青稞产业在实效中发挥应有的价值。

秦艳婷 2025-11-01 09:35:43

    2025.10.30对“利用青藏高原特色资源及青稞酒糟醒酒活性物的饮后舒适度的研究”项目进行查新，撰写了科技报告和工作报告，预期在11月中旬进行项目成果答辩。

秦艳婷 2025-11-01 09:39:37

    2025.4.26指导的研究生范宇迪、陶燕勤、冯晓焕入住青稞小院依托的青海互助天佑德青稞酒有限公司的公寓，每天赴公司窖池现场采集不同渣次的青稞酒糟，用于青稞酒糟中微生物的分离。 /Uploads/file/20251101/690566f408f0e.jpg|IMG_20181219_162423.jpg

秦艳婷 2025-11-01 10:45:04

    为改善青稞的结构和功能特性，以青稞为原料，采用传统发芽（TG）、微波预处理（MP）、先发芽后微波（MAG）的方法对青稞进行处理，并以不做处理的青稞作对照，比较处理前后蛋白质、脂质、膳食纤维、灰分、淀粉营养成分变化及持水性、持油性、水合特性(水溶性指数、吸水指数、膨胀势）、糊化特性理化性质变化，并通过扫描电镜、X-射线衍射、傅里叶光谱扫描分析了不同处理对青稞微观结构的影响。结果表明：[] MAG处理后，蛋白质含量提高，提高了38.3%，TG处理后，脂肪含量降低，降低了100%(P＜0.05）；MP与TG处理均可使青稞持水力降低，持油力提高，TG处理可以降低糊化黏度，MP处理可以提高糊化黏度，其中峰值黏度提高了3.24倍（P＜0.05）；对青稞微观结构及形态的观察，不同的处理均导致亮度值降低，其中MAG处理效果最显著；TG处理后青稞结构基本不变，MAG处理后青稞结构被破坏程度较MP处理大；对青稞结构分析中，不同的处理未对青稞的官能团结构产生改变；对青稞结晶度的分析，发现发芽可以促进结晶度形成，微波破坏了这一过程。总体而言，从营养成分提高、结构稳定层面来看，先发芽后微波处理对青稞特性的改善优于单一的发芽或微波处理，这可以为青稞加工提供新思路。

秦艳婷 2025-11-01 10:51:58

    研究目的 （1）研究青稞酒槽不同楂次中分离所得的乳酸菌的耐受乙醇能力，提高酒槽利用率同时筛选具有益生性的乳酸菌，为青海地区青稞酒槽的高值化利用提供参考。 （2）研究具有乙醇耐受性的乳酸菌的降解乙醇能力，并分析各菌株降解能力高低，为乳酸菌在酒精性肝损伤的保护作用中提供一定的理论支持。 （3）研究酒槽乳酸菌的其在胃肠道环境中的生存能力（耐酸、耐胆碱、黏附性能）和潜在健康益处（破坏内毒素能力、溶血活性测定、抑菌能力）。 （4）研究所筛选出得具有良好特性的乳酸菌对小鼠慢性酒精肝损伤的保护作用，进行乳酸菌保肝功效的验证。 /Uploads/file/20251101/6905764ca6728.jpg|微信图片_2025-11-01_105036_651.jpg

秦艳婷 2025-11-01 10:55:18

     首先采集天佑德企业青稞酒槽样品（一楂、二楂、三楂、四楂若干份）。样品置于无菌采样袋中，低温保存并速运至实验室。在无菌操作台，用稀释涂布法将样品涂布于含1.5% CaCO₃和1%西红柿汁的MRS固体培养基上，37℃厌氧培养48-72 h。培养后挑选有透明溶钙圈的单菌落，反复纯化至形态均一。纯化菌落经革兰氏染色镜检，选取乳酸菌特征的菌株，进行16S rRNA基因PCR扩增。PCR产物电泳检测后，送测序公司双向测序，确定菌株种属，而后测定各菌株的生长曲线。

秦艳婷 2025-11-01 10:56:41

    筛选乳酸菌纯菌株的乙醇耐受性：在含不同乙醇浓度的MRS培养基中接种，模拟青稞酒乙醇胁迫环境，37℃厌氧培养48 h。测定OD600nm值，评估生长状况并筛选生长速率下降率低于30%的菌株。对筛选出的菌株进行乙醇降解能力测试：接种到含10%乙醇的MRS培养基中培养后，采用重铬酸钾-硫酸法测定乙醇量并计算降解率。最终，结合耐受性与降解能力数据筛选综合性能优良的乳酸菌株。

秦艳婷 2025-11-01 10:57:34

     对筛选出来的具有优良降解乙醇能力的菌株进行体外益生性及安全性评估，对菌株进行采用牛津杯法进行抑菌能力试验，测定菌株破坏内毒素能力及体外安全性试验彻底菌株的溶血活性

秦艳婷 2025-11-01 10:58:16

    建立慢性酒精肝损伤小鼠模型，将筛选出的优良乳酸菌菌悬液每日灌胃给干预组小鼠，实验周期为12周，期间定期监测小鼠体重、摄食量及行为学变化。实验结束后，通过眼球采血收集血清样本，采用生化分析仪及试剂盒测定血乙醇测定试剂盒进行小鼠血清及肝脏样品生理生化指标及结肠内容物的肠道菌群结构变化分析。最终，通过对比各组数据，计算肝损伤改善率，并结合病理学结果，综合评价菌株的解酒护肝功效。